Рейтинг@Mail.ru
(495) 7-999-000 Адрес офиса
Корзина
ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНА Р24 ВИЧ-1 И АНТИТЕЛ К ВИЧ-1 И ВИЧ-2

Распространение ВИЧ инфекции приобрело характер глобальной катастрофы. Около 33,3 млн. человек в мире инфицировано ВИЧ, среди них 15,9 млн. женщин и 2,5 млн. детей до 15 лет [1]. Своевременное выявление ВИЧ, внедрение новых, усовершенствование существующих методов диагностики остается основным направлением по предотвращению распространения ВИЧ.

При скрининговых обследованиях населения на ВИЧ используют иммуноферментный анализ (ИФА). В тест-системах III и IV поколений рекомбинантные полипептиды используются в составе иммуносорбента (твёрдой фазы) и конъюгата, что позволило выявлять суммарные антитела (АТ) разных классов (IgG, IgM, IgA) и сократило серологическое окно. Тест-системы IV поколения (комбинированные) позволяют выявлять не только специфические АТ, но и антиген р24 ВИЧ-1 (АГ) посредством введения в систему моноклональных антител (МКАТ) к белку р24 ВИЧ-1 [5], что повышает чувствительность тест-системы и позволяет выявлять ВИЧ на ранних сроках, когда АТ к нему отсутствуют.

Тестирования коммерческих ВИЧ-сероконверсионных панелей сывороток производства Boston Biomedica Inc и ZeptoMetrix Corp. (США) различными тест-системами показывает, что чувствительность комбинированных ИФА-тестов приближается к показателю ПЦР анализа.

Широкое использование комбинированных тестов в службе крови делает актуальной задачу их дальнейшего совершенствования. Разработчики и производители постоянно исследуют новые подходы дальнейшего улучшения параметров чувствительности и специфичности комбинированных тестов.

Тест-система DIA-HIV Ag/Ab для одновременного определения АТ к ВИЧ ½ и АГ р24 ВИЧ-1 содержит полноразмерные рекомбинантные белки ВИЧ ½ и укороченные синтетические АГ, а также мощную систему биотин-стрептавидинового усиления с применением полимерной пероксидазы в составе конъюгата. Тест-система разработана российскими и украинскими учёными, выпускается в промышленных объёмах с 2011 года. Тест-система имеет регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения ФСЗ 2012/1336 от 30 ноября 2012 года.

С целью изучения характеристик разработанной тест-системы исследованы:

– положительные сыворотки от ВИЧ-инфицированных больных (837 образцов), полученные из областных центров СПИДа Украины;

– сыворотки доноров из областных станций переливания крови (2487 образцов), не содержащие маркёров ВИЧ;

1-й Международный стандарт АГ р24 ВИЧ-1 (HIV-1 p24 antigen, NIBSC, Великобритания);

– контрольный образец АГ р24 ВИЧ-1 (HIV-1IIIB p24 gag) – очищенный вирусный белок (ABІ, США);

– 1-я Международная референс-панель 02/210 (1-st International reference panel for anti-HIV), содержащая образцы плазмы крови с АТ к разным субтипам и группам ВИЧ (NIBSC, Великобритания);

– «Стандарт АГ(+) ВИЧ-1 р24 МБА» – панель сывороток крови человека, содержащих АГ р24 ВИЧ-1 в различных концентрациях (от 0,2 до 200 пкг/мл) для оценки качества ИФА тест-систем, используемых для выявления АГ р24 ВИЧ-1 (ООО «МедБиоАльянс», Россия).

– «Стандарт АТ(+) ВИЧ-1 МБА» – панель сывороток крови, содержащих АТ к ВИЧ-1 в различных концентрациях (ООО «МедБиоАльянс», Россия).

– «Стандарт АТ(+) ВИЧ-2 МБА» – панель сывороток крови, содержащих АТ к ВИЧ-2 в различных концентрациях (ООО «МедБиоАльянс», Россия).

– «Стандарт АТ(-) ВИЧ МБА» – панель сывороток крови, не содержащих АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (ООО «МедБиоАльянс», Россия).

– Сероконверсионные панели сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов - PRB 950, PRB 958, PRB 959 (BBI, США).

– Панель сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов, содержащая АГ р24 в разных титрах и АТ к ВИЧ - PRА 203 (BBI, США).

– Стандартная панель сывороток «СПП-ВІЛ ½», содержащая АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в различных титрах (ЧАО НПК «Диапроф Мед», Украина).

– Стандартная панель сывороток «СПН-ВІЛ ½», образцы которой не содержат АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, а также АГ р24 ВИЧ-1 (ЧАО НПК «Диапроф Мед» ,Украина).

Для установления достоверности полученных данных использованы показатели среднего арифметического результатов трёх повторов анализа исследуемых образцов в ИФА, стандартной ошибки и среднеквадратичного отклонения.

Тест-система DIA-HIV Ag/Ab, предназначена для скрининговых и подтверждающих исследований сывороток и плазмы крови человека на наличие АГ р24 ВИЧ-1 и суммарных АТ (IgG, IgM, IgA) к ВИЧ-1, ВИЧ-2.

Аналитическую чувствительность тест-системы определяли с использованием 1-го Международного стандарта р24 ВИЧ-1 (NIBSC), контрольного образца р24 ВИЧ-1 (ABI) (табл. 1) и «Стандарт АГ(+) ВИЧ-1 р24 МБА», содержащих различные концентрации АГ р24 ВИЧ-1 (ООО «МедБиоАльянс (Россия) (табл. 2).

Таблица 1

Аналитическая чувствительность «DIA-HIV-Ag/Ab» по выявлению АГ р24 ВИЧ-1

Стандарт ABI

Стандарт NIBSC

Концентрация, пкг/мл

ОП

ОП/ГЗ

Концентрация, МЕ

ОП

ОП/ГЗ

40

0,804±0,024

5,5±0,16

8

0,531±0,016

3,6±0,11

20

0,621±0,018

4,2±0,12

4

0,384±0,011

2,6±0,08

10

0,519±0,015

3,5±0,1

2

0,253±0,007

1,72±0,05

5

0,263±0,008

1,8±0,05

1

0,148±0,004

1,1±0,03

2,5

0,185±0,005

1,25±0,04

0,5

0,083±0,002

0,56±0,01

Примечание: ОП – оптическая плотность, ОП/ГЗ – соотношение оптической плотности к граничному значению, МЕ – международные единицы.

Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению стандарта р24 ВИЧ-1 ABІ составила 2,5 пкг/мл.

Таблица 2

Аналитическая чувствительность «DIA-HIV-Ag/Ab» на панели «Стандарт АГ(+) ВИЧ-1 р24 МБА»

«Стандарт АГ(+) ВИЧ-1 р24 МБА»

№ образца (концентрация р-24 ВИЧ-1)

ОП

ОП/ГЗ

№ образца (концентрация р-24 ВИЧ-1)

ОП

ОП/ГЗ

1 (200пкг/мл)

1,212±0,036

8,2±0,25

6 (5пкг/мл)

0,097±0,03

0,6±0,02

2 (100пкг/мл)

0,631±0,019

4,3±0,13

7 (2,5пкг/мл)

0,069±0,02

0,4±0,01

3 (50пкг/мл)

0,389±0,012

2,6±0,08

8 (1пкг/мл)

0,047±0,01

0,3±0,01

4 (20пкг/мл)

0,195±0,006

1,3±0,04

9 (0,5пкг/мл)

0,048±0,01

0,3±0,01

5 (10пкг/мл)

0,13±0,004

0,9±0,03

10 (0,2пкг/мл)

0,057±0,01

0,4±0,01

Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению АГ р24 ВИЧ-1 составляет 20 пкг/мл.

Таблица 3

Чувствительность «DIA-HIV-Ag/Ab» на панели сывороток 02/210 (NIBSC)

№ образца панели

АТ к субтипам и группам ВИЧ

Результаты

ОП

ОП/ГЗ

1

Анти-ВИЧ-1 субтип А группа М

3,387±0,10

23,0±0,69

2

Анти-ВИЧ-1 субтип В группа М

3,565±0,11

24,2±0,72

3

Анти-ВИЧ-1 субтип С группа М

3,319±0,10

22,5±0,67

4

Анти-ВИЧ-1 субтип Е группа М

3,233±0,09

21,9±0,66

5

Анти-ВИЧ-1 группа 0

1,098±0,03

7,5±0,22

6

Анти-ВИЧ-2

3,195±0,09

21,7±0,65

7

Отрицательный контроль

0,063±0,002

0,42±0,012

Тест-система выявляет АТ к субтитам А, В, С и Е ВИЧ-1 группы М, АТ к ВИЧ-1 группы О и АТ к ВИЧ-2, причём показатели соотношения ОП/ГЗ достаточно высокие.

Таблица 4

Чувствительность «DIA-HIV-Ag/Ab» на панели сывороток «Стандарт АТ(+) ВИЧ-1 МБА»

№ образца панели

Результаты

№ образца панели

Результаты

ОП

ОП/ГЗ

ОП

ОП/ГЗ

1

3.196±0,096

20.2±0,606

9

3.14±0,094

20.1±0,603

2

3.374±0,101

21.3±0,639

10

3.372±0,101

21.3±0,639

3

3.476±0,104

22.0±0,66

11

3.418±0,102

21.9±0,657

4

3.231±0,096

20.8±0,624

12

3.136±0,094

20.0±0,600

5

3.375±0,101

21.3±0,639

13

3.326±0,099

21.3±0,639

6

3.399±0,102

21.4±0,642

14

3.344±0,100

21.4±0,642

7

3.296±0,099

21.2±0,636

15

3.342±0,100

21.4±0,642

8

3.659±0,109

23.1±0,693

16

3.416±0,102

21.9±0,657

Все образцы панели сывороток с АТ к ВИЧ-1 выявлены как положительные с высоким соотношением ОП/ГЗ (от 21,1 до 23.1). Аналогично выявляются позитивными все образцы панели сывороток «Стандарт АТ (+) ВИЧ-2 МБА».

Таблица 5

Оценка «DIA-HIV-Ag/Ab» на сероконверсионной панели сывороток PRB 950

Образцы панели

Тест-системы, ОП/ГЗ

День забора крови

Abbott HIV1/2

Organon Teknika HIV

Abbott HIV Ag

DIA-HIV-Ag/Ab

PRB 950-1

0

0,2

0,3

0,5

0,4±0,012

PRB 950-2

18

0,2

0,3

0,7

1,2±0,036

PRB 950-3

21

0,2

0,3

3,3

5,9±0,177

PRB 950-4

28

15,5

0,4

4,1

6,4±0,192

Чувствительность тест-систем «Abbott HIV1/2», «Organon Teknika HIV», «Abbott HIV Ag» приведена из паспортных данных панели.

Согласно паспорта на панель PRB 950, тест-система «Abbott HIV Ag» выявляет как положительные образцы 3 и 4, тест-система «Abbott HIV1/2» – только 4, тест-система «Organon Teknika HIV» не определяет ни один из образцов панели положительным. Тест-система «DIA-HIV-Ag/Ab» определяет как положительные образцы 2, 3, 4.

Таблица 6

Оценка «DIA-HIV-Ag/Ab» на сероконверсионной панели сывороток PRB 958

Образцы панели

Тест-системы, ОП/ГЗ

День забора крови

Abbott HIV1/2

Organon Teknika HIV

Abbott HIV Ag

DIA-HIV-Ag/Ab

PRB-958-1

0

0,1

0,1

0,3

0,2±0,006

PRB-958-2

2

0,0

0,1

0,2

0,1±0,003

PRB-958-3

7

0,1

0,1

0,8

1,2±0,036

PRB-958-4

9

0,1

0,1

2,1

4,5±0,135

PRB-958-5

15

6,6

1,0

2,9

7,2±0,216

PRB-958-6

17

13,0

2,6

3,3

12,2±0,366

Согласно паспортным данным в образцах 1 и 2 отсутствуют специфические АТ к ВИЧ и АГ р24 ВИЧ-1. Тест-система «DIA-HIV-Ag/Ab» определяет как положительные образцы панели, начиная с 3-го (7 день после первого забора крови). Тест-система «Abbott HIV Ag» определяет как положительные образцы панели, начиная с 4-го, остальные тест-системы – начиная с 5-го и 6-го образцов.

Таблица 7

Оценка «DIA-HIV-Ag/Ab» на сероконверсионной панели сывороток PRB 959

Образцы панели

Тест-системы, ОП/ГЗ

День забора крови

Abbott HIV1/2

Organon Teknika HIV

Abbot HIV Ag

DIA-HIV-Ag/Ab

PRB-959-1

0

0,3

0,4

0,3

0,5±0,015

PRB-959-2

7

>16,7

0,8

12,5

25,1±0,753

PRB-959-3

9

>16,7

0,8

8,1

24,9±0,747

PRB-959-4

14

>16,7

5,9

>12,5

8,3±0,249

PRB-959-5

19

>16,7

5,6

>12,5

5,4±0,162

PRB-959-6

21

>16,7

5,9

>12,5

6,1±0,183

PRB-959-7

26

>16,7

5,4

>12,5

6,7±0,201

В панели PRB 959 только первая сыворотка (959-1) определена как отрицательная во всех тест-системах. В ней не выявлены АТ к ВИЧ, АГ р24 ВИЧ-1 и РНК-ВИЧ. Все остальные образцы панели в тест-системе «DIA-HIV-Ag/Ab» определены как положительные с высокими значениями соотношения ОП/ГЗ.

Таблица 8

Оценка «DIA-HIV-Ag/Ab» на панели сывороток PRA 203

Образцы панели

Тест-системы, ОП/ГЗ

Abbott Monoclonal HIV Ag

Dupont HIV Ag

Organon Teknik HIV Ag

IVCOMBI.CE 4th Generation

DIA-HIV-Ag/Ab

PRА203-01

4,3

5,7

16,8

2,3

2,3±0,069

PRА203-02

12,2

6,2

16,4

4,1

20,5±0,615

PRА203-03

6,0

8,7

9,3

1,4

4,2±0,126

PRА203-04

3,0

3,1

4,1

1,9

3,5±0,106

PRА203-05

4,9

1,2

8,2

-

27,9±0,837

PRА203-06

1,3

1,3

1,5

1,0

25,8±0,774

PRА203-07

5,7

2,8

12,1

2,9

25,9±0,777

PRА203-08

1,5

1,0

2,0

3,0

27,5±0,825

PRА203-09

0,5

0,2

0,2

0,4

0,8±0,024

PRА203-10

12,2

9,6

25,3

3,6

15,3±0,459

PRА203-11

3,1

3,9

5,8

2,4

2,8±0,086

PRА203-12

3,5

2,9

6,6

1,6

24,9±0,747

PRА203-13

2,1

1,1

2,4

1,2

9,3±0,279

PRА203-14

0,9

0,7

2,5

0,4

2,5±0,075

PRА203-15

2,5

2,8

5,9

3,3

2,8±0,084

PRА203-16

1,8

1,4

3,7

1,1

28,5±0,855

PRА203-17

6,3

4,0

6,1

2,5

17.5±0,525

PRА203-18

2,4

0,8

2,3

1,7

24.8±0,744

PRА203-19

0,5

0,2

0,3

0,4

0.3±0,009

PRА203-20

17,0

9,1

26,4

4,6

10.7±0,321

Все 18 положительных образцов панели в тест-системе «DIA-HIV-Ag/Ab» определены положительными, а образцы 9 и 19 – отрицательными.

Способность тест-системы выявлять АТ к ВИЧ1,2 в сравнении с её коммерческими аналогами двух ведущих мировых производителей (тест-система I и II) представлены в табл. 9. Для тестирования использована стандартная панель «СПП-ВІЛ 1/2».

Тест-система «DIA-HIV-Ag/Ab» и тест-система I выявила все образцы панели, содержащие АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, определяют как положительные, тогда как тест-система II не выявляет две сыворотки с АТ к ВИЧ-2.

Таблица 9

Оценка «DIA-HIV-Ag/Ab» на панели сывороток «СПП-ВІЛ ½» в сравнении с её аналогами

Образцы панели

Тест-системы, ОП/ГЗ

№1

№2

DIA-HIV-Ag/Ab

1

17,3

11,1

25,1±0,753

2

17,6

11,2

22,0±0,66

3

17,3

11,2

24,7±0,741

4

17,4

11,1

23,9±0,717

5

4,8

11,6

22,8±0,684

6

6,1

10,0

22,5±0,675

7

7,7

10,6

22,8±0,684

8

13,4

11,4

22,2±0,666

9

16,8

11,6

23,4±0,702

10

17,6

11,2

22,9±0,687

11

16,3

11,2

23,3±0,699

12

17,1

11,2

25,6±0,768

13

17,1

11,5

23,2±0,696

14

18,7

10,2

23,8±0,714

15

5,7

10,9

23,4±0,702

16

9,2

11,4

24,6±0,738

17

11,3

10,4

23,7±0,711

18

16,1

10,6

22,9±0,687

19

17,0

0,5

22,1±

20

15,6

0,4

21,2±

Для оценки чувствительности тест-системы протестированы 837 неразведённых сывороток ВИЧ-инфицированных пациентов. Все сыворотки определены как положительные в тест-системе «DIA-HIV-Ag/Ab», при этом в 9 образцах зарегистрированы АТ к ВИЧ в низких титрах (табл. 10).

Таблица 10

Оценка «DIA-HIV-Ag/Ab» и её аналогов с использованием неразведенных сывороток ВИЧ-инфицированных пациентов, содержащих АТ к ВИЧ в низких титрах

№ сыворотки

Тест-системы, ОП/ГЗ

№ 1

№ 2

DIA-HIV-Ag/Ab

1

1,4±0,042

4,3±0,126

4,3±0,129

2

0,4±0,012

1,9±0,042

3,3±0,099

3

0,69±0,021

1,4±0,042

1,6±0,048

4

0,77±0,023

9,4±0,282

1,4±0,042

5

17,6±0,528

11,5±0,345

3,1±0,093

6

14,9±0,447

10,0±0,30

5,0±0,150

7

5,9±0,177

5,4±0,162

4,4±0,132

8

3,96±0,119

3,6±0,108

3,7±0,111

9

9,69±0,291

4,2±0,126

7,4±0,222

Тест-система «DIA-HIV-Ag/Ab» определяет все 9 исследуемых сывороток как положительные, однако соотношение ОП/ГЗ при этом невысокое (от 1,4 до 7,4). Аналогичные результаты получены для тест-системы II, а в тест-системе I три сыворотки из девяти определяются как отрицательные (ложноотрицательные результаты).

Специфичность тест-системы «DIA-HIV-Ag/Ab» определяли с использованием стандартных панелей сывороток, не содержащих маркёров ВИЧ: «СПН-ВІЛ1/2» из 12 образцов и «Стандарт АТ(-) ВИЧ-МБА» из 20 сывороток. Все образцы сывороток определялись как отрицательные. Проанализированы 2487 донорских сывороток, полученных из станций переливания крови Украины, ложноположительных результатов не наблюдалось.

По результатам анализа донорских сывороток и образцов стандартных панелей специфичность тест-системы составила 100%.

С 2012 года «DIA-HIV-Ag/Ab» используется в станциях переливания крови (СПК) Украины. По отчётам лабораторий СПК за 1-й квартал 2013 года с использованием этой тест-системы исследовано 134486 образцов донорской крови, специфичность составила 99,8%.

Проведённые исследования продемонстрировали высокое качество тест-системы и соответствие её диагностических характеристик современным требованиям для ИФА тест-систем, применяемых для скрининга донорской крови. Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению Международного стандарта АГ р24 ВИЧ-1 (NIBSC, Великобритания) составила 1 МЕ/мл. По требованиям CTS (2009/108/ЕС) Комиссии Европейского Союза от 3 февраля 2009 г, аналитическая чувствительность для СЕ-маркированных ИФА тест-систем по выявлению Международного стандарта природного АГ р24 ВИЧ-1 должна составлять не более 2 МЕ/мл [5]. Аналитическая чувствительность тест-системы по выявлению АГ р24 ВИЧ-1 (ABI, США) составила 2,5 пкг/мл. При исследовании тест-системы с использованием панели «Стандарт АГ(+) ВИЧ-1 р24» (МБА, Россия) чувствительность набора составила 20 пкг/мл. Различия в чувствительности по определению АГ р24 ВИЧ-1 (2,5 и 20 пкг/мл) обусловлены различиями источника АГ и степени очистки используемых стандартов, и особенностями специфичности используемых в тест-системе МКАТ к АГ р24 ВИЧ-1. В паспортах на вышеуказанные стандарты указано, что р24 ВИЧ-1 (ABI, США) выделен из культуры клеток НUТ78, инфицированных вирусом HIV-1IIIB, очищен при помощи иммуноафинной хроматографии с использованием МКАТ к HIV-1IIIB p24 и HPLC, степень чистоты составляет 95%. Поставляется в буфере PBS без добавлений каких-либо белков, что позволяет оценить концентрацию и чистоту препарата. Стандарт АГ р24 ВИЧ-1 представляет собой набор из 10 образцов сыворотки донора, в которые внесён культуральный цельновирионный инактивированный АГ р24 ВИЧ-1 (штамм ЭВК/ИРА-3) в различных концентрациях. Сведения об очистке АГ не приведены. Концентрация АГ в каждом образце рассчитана калибровкой в ИФА относительно стандарта АГ р24 ВИЧ-1 фирмы «Bio-Rad» (США). Значительные различия национальных референс-препаратов АГ р24 ВИЧ-1 отметили эксперты ВОЗ при разработке 1-го Международного стандарта р24 ВИЧ-1 [6]. При количественной оценке содержания Международного стандарта р24 ВИЧ-1 относительно различных референс-АГ р24 ВИЧ-1, выраженных в пкг/мл (включенных в качестве калибраторов в 14 тест-систем различных производителей), установлено, что 1 МЕ/мл Международного стандарта р24 ВИЧ-1 соответствует диапазону концентраций различных стандартов от 2,4 пкг/мл до 26,9 пкг/мл. Различия делают актуальным задачу корректной калибровки национальных стандартов р24 ВИЧ-1 относительно Международного стандарта, а также разработки единых стандартов для каждого субтипа ВИЧ.

Продемонстрирована высокая способность тест-системы «DIA-HIV-Ag/Ab» определять АТ к ВИЧ различных групп и субтипов (ВИЧ-1: А, В, С, Е, О, ВИЧ-2).

Чувствительность тест-системы при исследовании образцов стандартных панелей и неразведенных сывороток от ВИЧ-инфицированных пациентов составила 100%. Тест-система выявляет АТ к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 в низких титрах и с более высокими сигналами, чем коммерческие аналоги ведущих мировых производителей.

Разработанная тест-система способна диагностировать ВИЧ-инфекцию на более ранних этапах заболевания, чем её коммерческие аналоги.

Разработанная тест-система обладает высокой специфичностью: при испытаниях в условиях предприятия - 100% (2519 образцов), в клинических лабораториях - 99,8% (134486 исследований).

Следует отметить высокую стабильность и точность тест-системы: показатель межсерийных различий коэффициента позитивности для 12 выпущенных промышленных серий тест-системы составил 5,87% (CV).

Тест-система «DIA-HIV-Ag/Ab» по диагностическим показателям качества (чувствительность и специфичность) отвечает современным международным требованиям к данному виду продукции и может быть использована в масштабных программах проведения скрининга донорской крови и подтверждения результатов исследований на ВИЧ.

ЛИТЕРАТУРА

1.        WHO. UNAIDS. Global report. Global summary of the AIDS epidemic. www. unaids.org

2.        ВИЧ-инфекция. Информационный бюллетень № 36 // Федеральный научно-методический центр по профилактике и борьбе со СПИДом. Москва. –  2012. – Инф. бюл. № 36. www. hivrussia.org

3.        ВІЛ-інфекція в Україні. Інформаційний бюлетень // К., МОЗ. − 2012. − №38.37 с.

4.        Практичний посібник з імуноферментного анализу /Іванська Н.В., Кислих О.М., Максименок О.В. та ін./ під ред. Гураля А.Л. та Співака М.Я. – K.: Діапроф-Мед, ДМП «Полімед», 2003. – 51 с.

5.        COMMISSION DECISION of 3 February 2009, amending Decision 2002/364/EC on common technical specification for in vitro-diagnostic medical devices (notified under document number C(2009)565), text with EEA relevance, (2009/108/EC)// Official Journal of European Union, 2009- Vol. 10, № 2. – P. 34-49.

Garrett A.J., Heath A.B. Report of a collaborative study on proposed HIV-1 p24 antigen reference reagents// EXPERT COMMITTEE ON BIOLOGICAL STANDARDIZATION, Geneva, 13-20 October 1992 – P. 1-22.