Диагностика ВИЧ
В настоящее время для определения антител к ВИЧ 1,2 применяются следующие системы проведения анализа:
- Иммуноферментные тест системы (ифа тест-системы) : принцип анализа, чувствительность и специфичность, соответствующие классическому иммуноферментному методу, считывание результатов анализа как визуальное, так и автоматическое на автоматическом спектрофотометре или ридере;
- Иммунохроматографические тест системы, которые обеспечивают минимальное время реакции, принцип анализа, отличный от классического иммуноферментного анализа.
Иммунохроматографические тесты (иха тесты) основаны на методе иммунохроматографии и для визуализации результата анализа используют окрашивание комплекса неферментативными частицами. ИФА тест-системы позволяют выявлять комплекс антиген-антитело с помощью субстрата, который расщепляется ферментом с появлением окрашивания (ферментативное окрашивание) характеризуются более высокой чувствительностью и специфичностью, чем ИХА тесты!
При ферментативном окрашивании для достижения окраски требуется меньшее количество комплексов антиген-антитело, так как каталитические свойства ферментов позволяют действовать им в качестве усилителей: одна молекула фермента может способствовать образованию более 1·105 молекул продукта каталитической реакции в минуту, при этом реакция фермента с субстратом высокоспецифична.
Для производства ИФА тест-систем наиболее часто используются такие ферменты как пероксидаза и щелочная фосфатаза. Французское агентство по контролю за медикаментами (ADA), оценивая тесты, разрешенные для использования в клиниках Европы, подчеркивает, что использование фосфатазно-щелочного конъюгата позволяет достичь наиболее высокой чувствительности по сравнению с тестами, основанными на пероксидазной реакции. Большинство иммуноферментных тест-систем российских производителей используют пероксидазный фермент из-за его невысокой цены.
В планшетных ИФА тест-системах ведущих зарубежных фирм Bio-Rad, Abbott, Roche применена ферментативная реакция окрашивания на основе щелочной фосфатазы, позволяющая достичь высокой чувствительности при выявлении антител к ВИЧ, в т.ч. в ранних сероконверсионных сыворотках. Возможность выявления низкоаффинных антител к ВИЧ, характерных для первых дней инфицирования, при использовании ИФА тест-систем подтверждена испытаниями ВОЗ, FDA и Государственными испытаниями России.
В Санитарно-эпидемиологических правилах СП 3.1.5.2826 -10 «Профилактика ВИЧ-инфекции», утверждённых 11.01.2011, указано: Стандартным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции служит определение антител/антигенов к ВИЧ с помощью ИФА. Для подтверждения результатов в отношении ВИЧ применяются подтверждающие тесты. Каждое исследование на ВИЧ с применением простых/быстрых тестов должно сопровождаться обязательным параллельным исследованием той же порции крови классическими методами ИФА, ИБ (пункт 4.8.2.).
Выдача заключения о наличии или отсутствии ВИЧ-инфекции только по результатам простого/быстрого теста не допускается. Результаты простых/быстрых тестов используются только для своевременного принятия решений в экстренных ситуациях (пункт 4.9.).